问题标题:
【关于从蛋清中提取溶菌酶及其结晶观察请问用树脂从蛋清中提取溶菌酶应该用什么样的树脂?得到溶菌酶粗提物后,在不断搅拌下加入研细的硫酸铵固体的目的是什么?】
更新时间:2024-05-04 02:29:24
问题描述:

关于从蛋清中提取溶菌酶及其结晶观察

请问用树脂从蛋清中提取溶菌酶应该用什么样的树脂?

得到溶菌酶粗提物后,在不断搅拌下加入研细的硫酸铵固体的目的是什么?

何秀凤回答:
  溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramideglycanohydrlase),是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶.主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解.溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活.因此,该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用.   该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富.从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个氨基酸残基构成的单一肽链.它富含碱性氨基酸,有4对二硫键维持酶构型,是一种碱性蛋白质,其N端为赖氨酸,C端为亮氨酸.可分解溶壁微球菌、巨大芽孢杆菌、黄色八叠球菌等革兰阳性菌.   由于鸡蛋清中的溶菌酶为碱性,一般采用酸性树脂进行提取.   得到溶菌酶粗提物后,在不断搅拌下加入研细的硫酸铵固体是为了盐析出溶菌酶.   向蛋白质溶液中加入某些浓的无机盐[如(NH4)2SO4或Na2SO4]溶液后,可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫做盐析.这样析出的蛋白质仍可以溶解在水中,而不影响原来蛋白质的性质.因此,盐析是一个可逆的过程.利用这个性质,可以采用多次盐析的方法来分离、提纯蛋白质.
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